dwuetapowa, najpierw nieznakowane swoiste Przeciwciało łączy się z antygenem, następnie związane już z antygenem Przeciwciało przyłącza drugie Przeciwciało
jest to substancja chemiczna wykazujące zjawisko fluorescencji. Ma zdolność do absorpcji światła o pewnej długości fali i emisji światła o innej długości fali
